溶液制备步骤因制备的溶液而异。这里有两个例子:
1:例如,制备0.05mol/L的400mL NaOH溶液的步骤:
为了准确配置氢氧化钠的浓度,应使用容量瓶进行定容。如果实验室没有400 ml容量瓶,应使用500 ml容量瓶。
1.计算所需氢氧化钠的质量:
0.5l * 0.05mol/l * 40.01 = 1.000g
2.在烧杯中称取1.000g氢氧化钠,加入少量水使其溶解,然后倒入500ml容量瓶中,洗涤烧杯三次,将所有溶液倒入容量瓶中,最后用水稀释至刻度线,摇匀,即得到0.05mol/L氢氧化钠溶液。
如果不需要很精确,可以直接用量筒量取400 ml。称重时,称0.8 g即可。
示例:制备200毫升1.5摩尔/升的稀硫酸:
第一步:计算:根据C1V1=C2V2计算浓硫酸的体积;
第二步:测量,用带刻度的移液管吸取浓硫酸的体积;
第三步:稀释:将浓硫酸转移到小烧杯中,加入少量水稀释;
第四步:转移:待溶液温度降低后,将烧杯中的硫酸转移至200mL容量瓶中;
第五步:清洗,清洗小烧杯和转移用的玻璃棒,至少清洗三次,将洗好的水一起转移到容量瓶中;
第六步:定容,加水定容至刻度线,用胶头滴管定容至距刻度线一厘米左右;
第七步:摇匀,将溶液摇匀,如果液面下降,不要加水定容;
第八步:将配制好的溶液转移到试剂瓶中,贴上标签;
举例:配制500毫升0.1摩尔/升碳酸钠溶液的步骤和注意事项
所需仪器:烧杯、容量瓶、玻璃棒、橡胶滴管、分析天平、药勺、量筒。
步骤:
第一步:计算:所需碳酸钠的质量= 0.5 * 0.1 * 106 = 5.3g
第二步:称量:在天平上称取5.3克碳酸钠固体,倒入小烧杯中;
第三步:溶解:在装有碳酸钠固体的小烧杯中加入适量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解;
第四步:移液:将溶液沿玻璃棒注入500mL容量瓶中;
第五步:洗涤:用蒸馏水洗涤烧杯2 ~ 3次,倒入容量瓶中;
第六步:定容:将水倒至1 ~ 2 cm的刻度线,用橡胶滴管滴至与凹面液面平齐;
第七步:摇匀:盖上瓶塞,倒过来,摇匀;
第八步:装瓶贴签;
误差分析:
固体药物的称量和液体药物的计量是否准确;
将溶液转移到容量瓶中,溶液溢出;
未清洗的烧杯和玻璃棒;
用待制备的液体润湿并清洗容量瓶;
体积一定的情况下,水的加入或多或少;
设置时间时,不会查看刻度线。
上下看对溶液浓度有什么影响?
★低头看刻度线,实际加水没有达到刻度线,增加了溶液中该物质的浓度;
★抬头看刻度线,实际加入的水超过刻度线,降低了溶液中该物质的浓度。
商品盐酸密度1.19,质量分数36% ~ 38%。
按37%计算:
步骤:
1.计算:
如果需要100mL的2mol/L硫酸,则需要16.6mL的37%浓硫酸;
计算过程如下:假设VmL盐酸盐:
(0.1L * 2mol/L * 36.5g/mol)/37% = V/1.19
V=16.59mL,考虑到量筒精度为0.1mL,所以取16.6m。
我会的。
2.测量:
16.6毫升浓硫酸;
3.溶解:
将16.6毫升浓硫酸倒入装有蒸馏水的小烧杯中,用玻璃棒不断搅拌。
4.转移:
溶液冷却后,沿玻璃棒倒入100ml容量瓶中。
5.洗涤:
用少量蒸馏水清洗烧杯和玻璃棒2-3次,并将所有洗涤液移入容量瓶中。
6.恒定体积:
向容量瓶中加入蒸馏水。当液面接近刻度线1-2厘米时,用滴管滴蒸馏水,直到一边刚好与刻度线相切。
7.摇匀:
塞住瓶塞,反复将容量瓶倒置数次,使瓶中溶液均匀。此时可以将溶液倒入试剂瓶中,贴上标签保存。完成准备过程。
容量瓶使用的六大禁忌:
1.避免用容量瓶溶解(体积不准确)
2.避免将液体直接倒入容量瓶(溢出)
3.避免加水超过刻度线(低浓度)
4.避免向上看或向下看的阅读(向上看的浓度低,向下看的浓度高)
5.避免不清洗玻璃棒和烧杯(低浓度)
6.避免将标准溶液储存在容量瓶中(容量瓶是测量装置,不是容器)
250ml 1mol/L氢氧化钠溶液完成以下步骤:
①用天平称量氢氧化钠固体/克。
②将称好的氢氧化钠固体放入烧杯中,加入少量蒸馏水溶解。完全溶解后,用玻璃棒将溶液移入250毫升容量瓶中。
③用少量蒸馏水冲洗2 ~ 3次,并将冲洗液移入容量瓶中。在操作过程中不要丢失任何液体,否则溶液的浓度会很低。
④向容量瓶加水至1 ~ 2 cm刻度线时,用胶头滴管小心加水,直至溶液凹面与刻度线相切。如果水超过刻度线,溶液的浓度将会很低,应重新配制。
⑤最后盖上瓶盖,摇匀,将配制好的溶液移入试剂瓶,贴上标签。
常用液体储存和溶液
1摩尔/升亚精胺:
将2.55克亚精胺溶解在足够的水中,使最终体积为10毫升。分成小份,储存在-20℃下。
1摩尔/升精胺(精胺):
将3.48克精胺溶解在足够的水中,使最终体积为10毫升。分成小份,储存在-20℃下。
10摩尔/升醋酸铵:
将77.1克醋酸胺溶于水中,加水至1L定容,用0.22微米孔径滤膜过滤灭菌。
10毫克/毫升牛血清白蛋白(BSA):
将100mg牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,不含脱氧核糖核酸酶)加入9.5mL水中(为减少变性,应将蛋白加入水中而不是水中),盖上盖子,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解。不要漩涡混合。加水定容至10毫升,然后分成小份,储存在-20℃下。
1摩尔/升二硫苏糖醇(DTT):
在5g二硫苏糖醇的原瓶中加入32.4mL水,分成小份并储存在-20℃,或转移100mg二硫苏糖醇。
向微量离心管中加入0.65毫升水,配制成1摩尔/升的二硫苏糖醇溶液。
8摩尔/升乙酸钾(乙酸钾):
将78.5克醋酸钾溶于足够的水中,加水至100毫升。
1摩尔/升氯化钾(KCl):
将7.46克氯化钾溶于足够的水中,加水至100毫升。
3摩尔/升醋酸钠:
将40.8克三水醋酸钠溶解在约90毫升水中,用冰醋酸将溶液的pH值调节至5.2,然后加水至100毫升。
0.5摩尔/升EDTA:
制备等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或者称186.1g na 2 EDTA & middot;2H2O和20g NaOH,溶于水,并定容至1L。
1摩尔/升HEPES:
将23.8gHEPES溶于约90mL水中,用NaOH调节pH值(6.8 ~ 8.2),然后用水定容至100ml。
1摩尔/升盐酸:
将8.6毫升浓盐酸加入91.4毫升水中。
25毫克/毫升IPGT:
250毫克IPGT(异丙基硫代-β;-D-半乳糖苷)溶于10毫升水中,分成小份,储存于-20℃。
1摩尔/升gCl2:
溶解20.3克MgCl2 & middot在足够的水中加入6H2O,使体积达到100mL。
100mmol/L PMSF:将174mg PMSF(苄基磺酰氟)溶于足量异丙醇中,定容至10ml。分成小份,在-20℃下用铝箔包裹或储存液体灌装管。
20毫克/毫升蛋白酶k(蛋白酶k):
将200毫克蛋白酶L加入9.5毫升水中,轻轻摇动,直到蛋白酶K完全溶解。不要漩涡混合。加水定容至10毫升,然后分成小份,储存在-20℃下。
10毫克/毫升重组酶(不含右旋nase)(右旋NASE-FRER-NASE):
将10毫克胰蛋白酶核糖核酸酶溶解在1毫升10毫摩尔/升乙酸钠水溶液(pH5.0)中。水浴溶解,煮沸15分钟,使DNA酶失活。用1mol/L Tris-HCl将pH值调节至7.5,并储存在-20℃下。(准备过程中应戴手套)
5摩尔/升氯化钠(NaCl):
将29.2克氯化钠溶于足量水中,使体积达到100毫升。
10N氢氧化钠(NaOH):
将400克氢氧化钠颗粒溶解在盛有约0.9升水的烧杯中(用磁力搅拌器搅拌)。氢氧化钠完全溶解后,用水定容至1L。
10%十二烷基硫酸钠:
称取100gSDS,慢慢转移到盛有约0.9L水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌,直至完全溶解。将水量设置为1L。
2摩尔/升山梨醇:
将36.4克山梨醇溶解在足够的水中,使最终体积为100毫升。
100%三氯乙酸(TCA):
在装有500gTCA的试剂瓶中加入100mL水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。(稀释剂应在使用前准备好)
2.5%X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β;-半乳糖苷):
将25mg X-gal溶解在1ml二甲基甲酰胺(DMF)中,用铝箔包裹液体填充管,并储存在-20℃下。
100 &次;登哈特试剂
10次;标准DNA连接酶缓冲液(粘性末端,平端连接)
100毫摩尔/升dNTP溶液(dNTP溶液)
可购买100mmol/L纯dNTPs原液,& mdash它可以在80℃下保存至少6个月。
10毫摩尔/升dNTP混合物
20 &次;最高法院律师
DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水
增加100 & muL DEPC溶于100mL水中,使DEPC的体积分数为0.1%。在37℃下水浴至少12小时,然后在15psi下高压灭菌20分钟以灭活残留的DEPC。DEPC会和胺反应,所以你不能用DEPC处理Tris缓冲液。
甲酰胺(去离子甲酰胺)
直接购买Dowex XG8混合树脂或加入装有甲酰胺的玻璃烧杯中,用磁力搅拌器轻轻搅拌1h,去除甲酰胺中的离子。用Whatman号滤纸过滤去除树脂,分成小份,充氮气,保存在-80℃(防止氧化)。
磷酸盐缓冲液(磷酸盐缓冲液)
根据下表给出的体积,将1 mol/L磷酸二氢钠(一碱)和1 mol/L磷酸氢二钠(二碱)储备溶液混合,得到所需pH的磷酸盐缓冲液。1mol/L磷酸二氢钠(NaH2PO4 & middotH2O)贮液:将138g溶于足量水中,制成最终体积的1L;1/l磷酸氢二钠(Na2HPO4)储备溶液:将142g溶解在足够的水中,制成1L的最终体积。
电泳缓冲液、染料和凝胶加样液
电泳缓冲液
50 & times三醋酸(TAE)缓冲液
1%溴酚蓝
将1g水溶性溴酚蓝钠加入100ml水中,搅拌或涡旋直至完全溶解。
1%二甲苯蓝FF(二甲苯蓝FF)
将1g二甲苯蓝FF溶解在足够的水中,使体积达到100ml。
10毫克/毫升溴化乙锭
仔细称取1g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。用铝箔包裹液体填充管,并在4℃下储存。
凝胶加载溶液(凝胶加载溶液)
6 &次;碱性凝胶装载溶液(储存在室温下)
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