微生物检测化验员手指口述操作法

微生物检测化验员手指口述操作法
　　　
　　　一、本岗位安全环境描述
　　　我是质保部化验员＊＊＊，负责产品微生物化验工作。本岗位仪器设备有电子天平1台，无菌操作台1台，紫外灯2盏，微波炉1台，电热恒温培养箱2台。
　　　1、电子天平为ALC—1100型：最大称量范围为1100g，精确度10mg。
　　　2、电热恒温培养箱型号为DNP9082，电源电压220v，功率300w，调控温度范围到65℃。
　　　3、微波炉型号为HR—7103E，电源电压220v,功率1200w。
　　　二、本岗位操作流程手指口述
　　　备齐试验所须物品，消毒无菌间（紫外灯照射30分钟），进入无菌间，更换隔离衣，75%酒精进行手消毒。
　　　1、大肠杆菌检验手指口述：
　　　①手指电子备齐天平口述并操作：调整天平水平位置，校准天平。
　　　②手指样品并口述：称取25g样品，放入225ml生理盐水中，摇匀，制成1：10稀释液。
　　　③手指吸管并口述：用10ml吸管从1：10稀释液中吸取10ml注入乳糖胆盐发酵管中，共接种三管。再吸取5ml注入含45ml生理盐水中，制成1：100稀释液。
　　　④另取1支10ml吸管，从1：100稀释液中吸取10ml注入发酵管中，共接种三管，再吸取5ml注入含45ml生理盐水中，制成1：1000稀释液。
　　　⑤另取1支10ml吸管，从1：1000稀释液中吸取10ml注入发酵管中，共接种三管。
　　　⑥将发酵管拿出放入恒温36℃的培养箱内，培养24小时，然后观察结果。
　　　2、菌落总数检验手指口述：
　　　①手指吸管并口述：取1ml吸管1支，从1：100稀释液中吸取1ml注入平皿中，共做两个平皿，另取1ml吸管从1：1000的稀释液中吸取1ml注入平皿中，共做两个平皿。
　　　②手指营养琼脂并口述：将凉至46℃的营养琼脂注入平皿中，每个注入15ml，转动平皿，使琼脂与检样混合均匀。
　　　③待琼脂凝固后，翻转平皿，将其放入恒温36℃的培养箱内，培养48小时，然后观察结果。
　　　3、大肠菌群结果观察
　　　①手指发酵管并口述：如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则报告阴性，如有产气者，将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂板上，36℃培养18～24小时，取出，观察群落形态，并做革兰氏染色和证实试验。
　　　②在上述平板上挑取可疑菌群菌落1～2个，进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，36℃培养24小时，观察产气情况，凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
　　　③报告：根据阳性管数，查MPN检索表，报告大肠菌群数。
　　　4、菌落总数报告
　　　①菌落在100以内，按实数报告，大于100时，取2位有效数字（4舍5入）报告。
　　　②计数时应选菌落在30～300之间的平皿，以2者比值决定，比值小于或等于2取平均数，大于或等于2取较小数字。
　　　③若所有稀释度均不在30～300之间，大于300取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告；均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
　　　④当平皿内菌落过多，但分布均匀时，可取平皿一半或1/4计数，再乘以相应稀释倍数报告。
　　　三、安全预想要诀
　　　1、严禁用湿手或湿布触摸、擦电子天平及其它带电设备。
　　　2、恒温箱应放在通风干燥处，远离易燃易爆物。
　　　3、维修微波炉时，应拔掉主电源，加热时严禁用手接触表面，以防烫伤。