层析法
色谱也叫& ldquo色谱分析& rdquo、& ldquo色谱分析& rdquo、& ldquo色谱法& rdquo,是一种分离分析方法,广泛应用于分析化学、有机化学、生物化学等领域。
色谱利用不同物质在不同相中的选择性分布,用流动相洗脱固定相中的混合物。混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离效果。
分离原理
使混合物中的组分分布在两相之间,其中一相为固定相,称为固定相;另一相是推动混合物通过固定相的流体,固定相称为流动相。当流动相中的混合物通过固定相时,它将与固定相相互作用。由于各成分的性质和结构不同,相互作用也不同。
因此,在相同的驱动力下,不同组分在固定相中的保留时间有长有短,从而以不同的顺序从固定相中流出。这种利用两相分配原理将混合物中的组分分离出来的技术,称为色谱分离技术或色谱法。
色谱分类
气体和液体用作色谱流动相。当液体用作流动相时,称为液相色谱。当气体用作流动相时,称为气相色谱。对于色谱固定,也有两种状态:固体吸附剂和固定单体上有液体的固定相。
色谱法可分为三类:气相色谱法、液相色谱法和广义毛细管电泳法。
色谱的特征
优势:
高分离效率
高灵敏度
分析速度快。
应用范围广
设备简单,操作方便。
缺点:
在没有标准样品的情况下,定性分析比较困难,沸点高、不气化、热不稳定的物质无法用气相色谱法分离测定。
气相色谱分析
气相色谱(GC)是一种色谱技术,用于分离和分析有机化学中不分解的挥发性化合物。
简单来说,气相色谱就是以气体为流动相的色谱分析,气固、气液色谱。
特点:
应用范围广:样品必须具有足够高的蒸汽压;
分离效率高:可分离分析复杂和相似的混合物;
高灵敏度:高灵敏度的通用检测器;
分析速度快:几分钟或几十分钟。
液相色谱法
液相色谱是一种以液体为流动相的色谱。
液相色谱的分离机理是基于混合物中各组分对两相的亲和力不同。根据固定相的不同,液相色谱可分为液-固色谱、液-液色谱和键合相色谱。最广泛使用的方法是以硅胶为填料的液-固色谱法和以硅胶为基质的键合相色谱法。根据固定相的形式,液相色谱可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱。根据吸附力的大小,可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法和凝胶渗透色谱法。近年来,在液相柱色谱系统中加入高压液流系统,使流动相在高压下快速流动,以提高分离效果。因此出现了高效液相色谱(也叫高压)。
固定相是高效液相色谱的核心,其性能直接影响着最终的分离分析结果。开发满足分离分析要求的新型固定相对高效液相色谱的应用和发展至关重要,也是解决当前面临的分离分析问题的关键措施。
RPLC具有分辨率高、选择性强、分离重现性好的特点,是目前应用最广泛的色谱模式,适用于大部分弱极性和中等极性化合物的分离分析。
毛细管电泳
高效毛细管电泳(ce)又称毛细管电泳,是指以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道。一种液相分离技术,其根据样品中各组分之间的迁移率(电渗析单位)和/或分布行为的差异实现分离。
它是经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物。